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Prior显微镜电动平台在质子易位研究中的应用

作者:admin  时间:2022-7-27 4:41:11

英国 Prior Scientific最具优势和竞争力的领域是显微镜平台、显微镜载物台。PRIOR专注于精密运动,自动化和光学设计的几乎所有方面,这篇文章介绍了Prior显微镜载物台相关在生物和化学领域的应用,如:质子易位,LED光毒性,引导骨再生(GBR



Prior显微镜电动载物台在LED光毒性研究中的应用

MDPI的一篇文章报道了Prior显微镜电动载物台在LED光毒性研究中的应用,文章名为Miralles de Imperial -Ollero, J.A.; Gallego-Ortega, A.; Norte-Muñoz, M.; Di Pierdomenico, J.; Bernal-Garro, J.M.; Valiente-Soriano, F.J.; Vidal-Sanz, M. Short- and Long-Term Study of the Impact of Focal Blue Light-Emitting Diode-Induced Phototoxicity in Adult Albino Rats. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 9742.

穆尔西亚大学(Universidad de Murcia)发表的这篇文章的中文标题可以翻译为:局灶性蓝光发光二极管诱导的成年白化大鼠光毒性影响的短期和长期研究。在成年大鼠中,我们研究了局灶性蓝光发光二极管(LED)诱导的光毒性(LIP)对视网膜厚度和Iba-1+激活的短期和长期影响。方法:将先前适应黑暗的Sprague Dawley (SD)大鼠的左眼曝光于蓝色LED20秒,200勒克斯)。用SD-OCTLIP130(d)对视网膜厚度、眼底图像和光学视网膜切片进行体内纵向监测。离体,我们分析了S-coneIba-1+的种群以病灶为中心的预定固定大小圆形区域(PCA)内的细胞。结果:LIP导致在体内通过眼底检查容易识别的圆形局灶性病变,其显示在PCA内视网膜外层逐渐变薄,并且到30S锥群减少至19%。与S-cone损失平行,活化的Iba-1+细胞描绘了病变区域并获得了阿米巴形态,在LIP3天达到峰值表达。Iba-1+细胞在第7天采用更松弛的分枝形态,到14-30天,它们的形态完全分枝。结论:LIP导致外层视网膜逐渐缩小,S锥消失,损伤区域小胶质细胞平行动态激活。

使用配备数码相机(ProgResC10JenopticJenaGermany)和计算机驱动的电动载物台(ProScanH128 系列;Prior Scientific InstrumentsCambridgeUK)由 Image-Pro Plus 软件(Windows IPP 5.1Media Cybernetics,Silver SpringMDUSA)控制,遵循我们实验室的标准协议。Wholemounts的蒙太奇由并排捕获的90个连续帧构成,如有必要,使用图形编辑程序(Adobe Photoshop CS 8.0.1; Adobe Systems, Inc., San Jose, CA, USA) 进一步处理图像。


Prior Scientific显微镜平台在引导骨再生(GBR)研究中的应用

MDPI的一篇文章报道了Prior Scientific显微镜平台在引导骨再生(GBR)研究中的应用,文章名为Jung, O.; Hesse, B.; Stojanovic, S.; Seim, C.; Weitkamp, T.; Batinic, M.; Goerke, O.; Kačarević, Ž.P.; Rider, P.; Najman, S.; Barbeck, M. Biocompatibility Analyses of HF-Passivated Magnesium Screws for Guided Bone Regeneration (GBR). Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 12567.

罗斯托克大学( University Medical Center Rostock)发表的这篇文章的中文标题可以翻译为:用于引导骨再生 (GBR)HF钝化镁螺钉的生物相容性分析。镁(Mg)具有弹性模量、可吸收和再生特性等材料特性,是最有希望用于人类外科手术的材料之一。在这项研究中,在体外和体内研究了用于颌面和牙科手术应用的HF涂层和未涂层的新型生物可吸收镁固定螺钉,以评估HF涂层的生物相容性。方法:研究了经过氢氟酸(HF)表面处理或未经处理的镁合金螺钉。体外研究包括符合DINISO10993-5/-12XTTBrdULDH。在体内,螺钉被植入兔子的胫骨。3周和6周后,对退化、局部组织反应和骨整合进行组织病理学和组织形态计量学分析。此外,还进行了SEM/EDX分析和同步加速器相位对比显微断层扫描(µCT)测量。体外分析表明,Mg螺钉具有细胞相容性,当表面用HF钝化时,结果得到改善。在体内,与未经处理的镁螺钉相比,植入的HF处理的镁螺钉显示出气体形成减少、生物降解更慢和骨整合更好。组织病理学上,HF钝化的螺钉在其生物降解过程中诱导了一层巨噬细胞,而未经处理的螺钉引起了轻微的纤维组织反应。SEM/EDX分析表明,两颗螺钉在其表面形成了相似的磷酸钙层,并被骨骼包围。此外,µCT揭示了螺钉的金属芯、更快吸收腐蚀前沿和腐蚀镁的缓慢吸收区域的存在。结论:总体而言,与未经处理的螺钉相比,HF钝化的Mg固定螺钉在体外和体内表现出显着更好的生物相容性。

组织形态计量学分析是根据先前发表和建立的方法进行的。分析包括镁螺钉剩余面积的比较测量,即生物降解和骨-植入物接触以及气腔测量。

简而言之,借助专门的扫描显微镜生成所谓的“全扫描”,该显微镜由Eclipse 80i组织显微镜与DS-Fi1数码相机和Prior Scientific显微镜平台(Prior ScientificRocklandMA)连接到运行蔡司软件(Carl Zeiss Microscopy GmbH,德国)的 PC 系统。生成的图像由100120张单张图像组成,放大100倍,分辨率为2500×1200像素,包含完整的种植体区域以及Mg螺钉的种植体周围组织。

为了计算Mg螺钉的生物降解率,测量了两个研究组中Mg螺钉的剩余面积。此外,测量螺钉三个部分的直径,除以镁螺钉不同区域的各自离体直径,最后以百分比表示。

此外,对螺钉的骨-植入物接触,即插入区域,进行了组织形态学分析。使用蔡司软件(CarlZeiss Microscopy GmbH,德国)的长度测量工具,将螺钉与骨头直接接触的面积与其初始插入面积进行比较,并以百分比表示。

使用蔡司软件(Carl Zeiss Microscopy GmbH,德国)的面积测量工具来确定所有组的 Mg螺钉的种植体周围组织内的气腔面积。



Prior Scientific显微镜电动平台在质子易位研究中的应用

MDPI的一篇文章报道了Prior Scientific显微镜电动平台在质子易位研究中的应用,文章名为Hugentobler, K.G.; Heinrich, D.; Berg, J.; Heberle, J.; Brzezinski, P.; Schlesinger, R.; Block, S. Lipid Composition Affects the Efficiency in the Functional Reconstitution of the Cytochrome c Oxidase. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 6981.

柏林自由大学(Freie Universität Berlin)发表的这篇文章的中文标题可以翻译为:脂质成分影响细胞色素c氧化酶功能重组的效率。跨膜蛋白细胞色素c氧化酶(CcO)是许多需氧生物呼吸链中的末端氧化酶,可催化分子氧还原为水。该过程在承载氧化酶的膜上保持电化学质子梯度。CcO是生物能学中一种成熟的模型酶,用于研究这些过程中涉及的质子耦合电子转移反应和质子化动力学。其催化机制正在进行深入研究。然而,以前的研究主要集中在CcO中氧和电子的转换,而研究报告Cc的质子转换率O,即酶吸收质子的速率,是稀缺的。在这里,我们将来自R.sphaeroides的CcO重组为含有pH敏感染料的脂质体,并使用荧光显微镜探测单个蛋白脂质体内pH值的变化。CcO质子周转率在单酶水平上进行量化。此外,我们记录了蛋白脂质体群体中功能性重组的CcOs数量的分布。使用由天然脂质来源制成的蛋白脂质体进行研究,例如大豆脂质的粗提物和大肠杆菌的极性脂质提取物,以及纯化的脂质部分,例如从大豆脂质中提取的磷脂酰胆碱。结果表明,这些脂质组合物对CcO质子转换率的影响很小,但对功能活性CcOs的重构效率有很大影响。特别是,我们的实验表明,通过添加阴离子脂质(如磷脂酰甘油和心磷脂)强烈促进了CcO的有效功能重组。


显微镜测量均在配备100×Plan-Apo油浸物镜(NA1.45)、Lumen 200 Prior Scientific平移台(Prior Scientific, Cambridge, UK)的Nikon Eclipse Ti-E显微镜(Nikon, Düsseldorf, Germany)上进行白色光源和Andor Zyla 4.2 sCMOS相机(Oxford Instruments,Oxford,UK)。所有测量均使用 ND32中性密度强度滤光片、sCMOS相机的2×2分档以及使用由460nm激发滤光片(14nm带宽)、495nm二向色滤光片和460nm发射组成的二向色滤光片组完成滤光片(5nm带宽)。

通过粒子追踪分析确定尺寸-进行粒子追踪分析(PTA)以确定不同脂质体制剂的尺寸。脂质体在pH6.5的测定缓冲液中稀释100倍,并注入自制的PDMS印章中,提供4个孔(每个5μL体积)安装在盖玻片上(#1;Menzel-Gläser,Braunschweig,Germany)。每个样本以每秒16.6帧的采集速率测量超过200帧,并记录了至少5部独立电影。如Müller等人所述,使用单粒子跟踪对悬浮的脂质体进行跟踪。和流体动力学半径由使用斯托克斯-爱因斯坦关系测量的体积扩散系数确定。




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